Endophytic colonization of five Trichoderma species and their effects on growth of a Eucalyptus hybrid.

The study aimed to evaluate the effectiveness of endophytic colonization via leaf and root inoculation of five Trichoderma species in a Eucalyptus hybrid, as well as the effects of inoculation on plant growth. The experimental design was completely randomized in a 6 × 2 factorial scheme. Plant growth was evaluated during the experimental period at three different times: 20 days after inoculation (d.a.i), 40 d.a.i., and 60 d.a.i. A statistical difference was observed between the inoculation methods during each period and between the Trichoderma species. Plants inoculated with T. asperellum showed the greatest growth among the treatments. Root-inoculated plants produced the greatest growth response. This showed that the presence of Trichoderma in the roots assisted in nutrient assimilation, promoted greater plant growth, when compared with leaf-inoculated plants. Evaluation of the effectiveness of endophytic colonization was performed at each sampling period by collecting leaf samples, and at 60 d.a.i., by collecting leaf, stem, and root samples. T. longibrachiatum and T. harzianum were isolated from leaves at 20 d.a.i., with an increase in the number of colonized plants throughout the evaluation of leaf-inoculated plants. In root-inoculated plants, treatment with T. longibrachiatum, T. harzianum, and T. asperellum presented the highest endophytic colonization in the stem and root samples (at 60 d.a.i.).

Essential Oil of Cymbopogon citratus on the Control of the Curvularia Leaf Spot Disease on Maize.

The Curvularia Leaf Spot is becoming more common due to the culture expansion and the low resistance of the cultivated genotypes in tropical regions. Thus, the objective was to evaluate the fungitoxicity of the essential oil of Cymbopogon citratus upon the phytopathogen Curvularia lunata, causative agent of the Curvularia Leaf Spot. There was realized pathogenicity tests of C. lunata in maize plants, phytotoxicity of the essential oil of C. citratus and gas chromatography attached, germination tests of the conidia, and of in vitro inhibition of C. lunata. Also, there were realized tests aiming at verifying the phytopathogen control in vivo. In the pathogenicity tests, there were verified symptoms of the disease in all of the suspensions tested on plants. It was observed that the essential oil concentrations of 7.5 µL mL-1 to 50 µL mL-1 were phytotoxic. The majoritarian chemical components of the essential oil of C. citratus were Geranial (41.46%) and Neral (32.43%). The concentrations of 5 and 7.5 µL mL-1 inhibited 100% of conidia germination. None of the concentrations evaluated effectively inhibited C. lunata mycelial growth in in vitro tests. In the preventive control, the concentration of 7.5 µL mL-1 was sufficient for the reduction of the progress of the disease, however the curative control was not efficient on the tested dosages.

Biomassa e extração de quitina e quitosana a partir de isolados de Cunninghamella sp / Biomass and chitin and chitosan extraction from Cunninghamella sp. Isolates

O estudo objetivou avaliar a produção de biomassa de nove isolados de Cunninghamella sp. e da cepa referência de Cunninghamella elegans (CBMAI 0843) e estabelecer a capacidade de produção de quitina e quitosana por estas cepas. Assim como, caracterizar a quitosana fúngica obtida por parâmetros como massa molar, grau de desacetilação e distribuição dos grupos funcionais ao longo da cadeia polimérica. Para a maioria das cepas avaliadas, o período de maior crescimento foi em 48 horas de cultivo, sendo que, neste período, o isolado UFT Ce08 apresentou a maior quantidade de biomassa, 20,17 g L-1. Os rendimentos de quitina ficaram entre 15,64 a 30,33% e os rendimentos de quitosana entre 0,94 a 7,43%. A cepa UFT Ce11 apresentou o melhor quantitativo de quitina e a cepa UFT Ce09, mesmo apresentando o segundo menor quantitativo de biomassa, 9,34 g L-1, teve o melhor rendimento de quitosana. Sete cepas isoladas no presente estudo apresentaram maior rendimento de quitosana comparada à cepa referência. O grau médio de desacetilação foi de 83,7% para quitosana obtida do isolado UFT Ce09 e 80,5% para quitosana obtida da cepa referência. As massas molares para a quitosana do isolado UFT Ce09 e da cepa referência foram de 43,031 e 19,215 g mol-1, respetivamente. A espectrometria de infravermelho apresentou bandas com comprimentos de onda e grupos funcionais coincidentes com a literatura e com a quitosana comercial. A quitosana fúngica deste estudo apresentou propriedades que atestam sua qualidade e características de interesse biotecnológico e comercial (AU).

The aim of this study was to evaluate the biomass production of nine Cunninghamella sp. isolates as well as by the reference strain Cunninghamella elegans (CBMAI 0843) and establish the chitin and chitosan production capacity by these strains. For most of the tested strains, the highest growth period was within 48 hours of cultivation, although the UFT Ce08 isolate showed the highest amount of biomass, with 20.17 g L-1. Chitin yields were between 15.64 to 30.33% and chitosan yields were between 0.94 to 7.43%. The UFT Ce11 strain presented the best chitin quantity and UFT Ce09 strain, even with the second smallest biomass quantity, had the best chitosan yield. This means that seven isolated strains in this study showed higher chitosan yield compared to the reference strain. The degree of deacetylation was 83.7% for the chitosan obtained from the UFT Ce09 isolate and 80.5% for the chitosan obtained from the reference strain. The chitosan molecular weight for the UFT Ce09 isolate and the reference strain were 43.031 g mol-1 and 19.215 g mol-1, respectively. The infrared spectroscopy presented bands with wavelengths and functional groups coincident to the literature and to the commercial chitosan. The fungal chitosan of this study showed properties that confirm its quality and characteristics of biotechnological and commercial interest (AU).

Assessment of lipolytic activity of isolated microorganisms from the savannah of the Tocantins / Avaliação da atividade lipolítica de microrganismos isolados do Cerrado tocantinense

Current study assesses the biodiversity and selects lipase-producer microorganisms with industrial interest, from the savannah of the state of Tocantins, Brazil. Seventeen pequi microorganisms (Caryocar brasiliense) were isolated in the decomposition stage and 35 microorganisms were retrieved from the soil fraction under the collected pequi. Yarrowia lypolitica strain was used as positive control in all assays. The 52 strains were subjected to tests in a solid medium with Tween 20 for checking halos formed by crystals, indicating lipase production by inoculated strains. Another test to confirm lipase producers was conducted in microplates with liquid medium and enriched with p-nitrophenyl palmitate (pNPP) monitored at 410 ηm. The AS16 and AP5 strains showed the highest activity for test conditions, namely, 0.072 and 0.067 U mL-1 respectively. Rates were higher than the lipase activity of Yarrowia lypolitica(0.052 U mL-1), a reference strain in current assay.

O atual estudo avalia a biodiversidade e selecionou microorganismos produtores de lipases de interesse industrial, a partir do cerrado tocantinense. O principal objetivo deste trabalho é avaliar a biodiversidade e selecionar microrganismos do cerrado tocantinense, produtores de lipases de interesse industrial. Foram isolados 17 microrganismos de Pequi (Caryocar brasiliense) em estágio de decomposição e também 35 microrganismos provenientes da fração do solo que se encontrava abaixo do pequi coletado. Foi utilizada uma cepa de Yarrowia lypolitica como controle positivo em todos os ensaios. Todas as 52 cepas foram submetidas a testes em meio sólido, utilizando Tween 20 para a verificação da presença de halos formados por cristais, indicando produção de lipase pelas linhagens inoculadas. Outro teste para confirmação dos produtores de lipase foi realizado em microplacas contendo meio líquido e enriquecido com pNPP (Palmitato de p-nitrofenila), monitorado a 410 ηm. As cepas AS16 e AP5 apresentaram as maiores atividades para as condições de ensaio a que foram submetidas: 0,072 e 0,067 U mL-1 respectivamente, sendo estes valores maiores que a atividade lipolítica da Yarrowia lypolitica (0,052 U mL-1), considerada como cepa referência para este trabalho.

Efeito da adubação orgânica na produção de biomassa e bioatividade do óleo essencial do capim citronela / Effect of organic fertilization on biomass production and bioactivity of citronella grass essential oil

RESUMO Este trabalho teve como objetivo analisar o efeito da adubação orgânica no crescimento e na produção de biomassa do capim citronela (Cymbopogon nardus), assim como avaliar o efeito do óleo essencial do capim citronela e do composto citronelal na inibição do crescimento micelial do fungo Didymella bryoniae. Na avaliação do efeito da adubação orgânica no crescimento do capim citronela, foi utilizado o delineamento em blocos casualizados em esquema de parcela subdividida. As parcelas foram constituídas por quatro doses de adubação orgânica de esterco bovino curtido (0, 3, 6 e 9 Kg cova-1) e as subparcelas por cinco épocas de amostragem (80, 108, 136, 164, 192 dias após o transplante). Para avaliar a fungitoxicidade do óleo essencial do capim citronela na inibição do crescimento micelial do fungo D. bryoniae, foi instalado no delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial. Os tratamentos foram compostos por cinco alíquotas (5, 10, 15, 20 e 25 µL) do óleo essencial do capim citronela e do composto citronelal, em cinco épocas de amostragem. Verificou-se no tratamento de adubação orgânica de 9 Kg cova-1 os maiores valores em todas as variáveis analisadas na última época de amostragem. Constatou-se maior efeito de inibição do crescimento micelial utilizando o citronelal em comparação com o óleo essencial. Na alíquota de 25 µL do citronelal ocorreu inibição total do crescimento micelial do fungo D. bryoniae.

Efeito de óleos essenciais de plantas medicinais sobre a antracnose do sorgo / Effect of essential oils of medicinal plants on the anthracnose of sorghum

Objetivou-se avaliar a fungitoxicidade in vitro dos óleos essenciais de capim-limão, citronela, erva-cidreira e hortelã-pimenta sobre o fungo Colletotrichum graminicola (Ensaio I) e o efeito in vivo desses óleos e do óleo comercial de nim sobre a antracnose do sorgo (Ensaio II). No Ensaio I avaliou-se, em cinco épocas (dois, quatro, seis, oito e dez dias de incubação), o crescimento micelial do C. graminicola sob cinco concentrações dos óleos essenciais (C1= 0,25 µL mL-1; C2= 0,50 µL mL-1; C3= 0,75 µL mL-1; C4= 1,0 µL mL-1; C5= 1,25 µL mL-1). No Ensaio II, para avaliar o efeito preventivo, utilizou-se cinco tipos de óleos (capim-limão, citronela, erva-cidreira, hortelã-pimenta e nim) em quatro concentrações (2,5, 5,0, 7,5 e 10,0 µL mL-1). Para o efeito curativo, foram utilizados os mesmos óleos do efeito preventivo em duas concentrações (2,5 e 5,0 µL mL-1). Os óleos essenciais de C. nardus e C. citratus foram os mais eficientes na redução do crescimento micelial de C. graminicola (Ensaio I). No Ensaio II, no efeito preventivo, tanto os óleos essenciais quanto as concentrações reduziram significativamente a severidade da doença, destacando-se os óleos de capim-limão, erva-cidreira e nim. No efeito curativo, os tratamentos reduziram a severidade, porém não apresentaram diferença significativa entre si.

The objective was to evaluate the in vitro fungitoxicity of essential oils of lemongrass, citronella, lemongrass and peppermint on the fungus Colletotrichum graminicola (Test I) and in vivo effects of these oils and neem oil trade on the anthracnose sorghum (Test II). In Test I was evaluated in five seasons (two, four, six, eight and ten days of incubation), the mycelial growth of C. graminicola under five concentrations of essential oils (C1= 0,25 µL mL-1; C2= 0,50 µL mL-1; C3= 0,75 µL mL-1; C4= 1,0 µL mL-1; C5= 1,25 µL mL-1). In Test II, to assess the preventive effect, we used five types of oils (lemongrass, citronella, lemon balm, peppermint and neem) at four concentrations (2,5, 5,0, 7,5 e 10,0 µL mL-1). For curative effect, we used the same oils of preventive effect in two concentrations (2,5 e 5,0 µL mL-1). The essential oils of C. nardus and C. citratus were the most effective in reducing mycelial growth of C. graminicola (Test I). In Test II, the preventive effect, essential oils and concentrations significantly reduced the severity of the disease, especially oils of lemongrass, lemon balm and neem. In the curative effect, treatments reduced the severity, but no significant differences between them.

Efeito da adubação mineral na produção de biomassa e no teor e composição do óleo essencial do capim-citronela / Effect of mineral fertilization on the production of biomass and the content and composition of the essential oil of grass citronella

Este trabalho teve por objetivos avaliar o efeito de quatro doses de adubo mineral na produção de biomassa, no teor e na composição do óleo essencial do capim-citronela (Cymbopogon nardus) em cinco épocas de colheita. Na avaliação da produção de biomassa do capim-citronela foi adotado o delineamento experimental em blocos casualizados, em esquema de parcela subdividida, com cinco repetições. As parcelas foram constituídas por quatro doses de adubo mineral com fertilizantes NPK (0, 50, 100 e 150% da dose recomendada); a recomendação de adubação mineral foi de 100 kg ha-1 P205, 40 hg ha-1 K2O e 50 kg ha-1 N fornecidos por superfosfato simples, cloreto de potássio e sulfato de amônio respectivamente; as subparcelas por cinco épocas de avaliação (60, 88, 116, 144 e 172 dias após o transplante). O óleo essencial foi obtido por hidrodestilação e a identificação dos compostos do óleo essencial por CG/EM. A adubação mineral de 150 % da dose recomendada propiciou as maiores taxas de crescimento em todas as variáveis analisadas. Os maiores teores de óleo essencial foram obtidos nas doses de 100% (1,59%) e 150% de NPK (1,67%). Foram identificados dez compostos químicos no óleo essencial do capim-citronela, entre monoterpenos e sesquiterpenos. Os compostos majoritários do óleo essencial foram o citronelal, o geraniol e o elemol. O teor e a composição do óleo essencial do capim-citronela variaram conforme a dose de adubo mineral utilizado.

This study aimed to evaluate the effect of four doses of mineral fertilization in biomass production, the content and composition of essential oil of citronella grass (Cymbopogon nardus) in five harvest seasons. In the evaluation of the production of biomass of citronella grass was adopted the statistical design in block randomized in a subdivided plot scheme, with five repetitions. The plots consisted by four levels of mineral fertilization with fertilizers NPK (0, 50, 100 and 150% of the recommended dose) the recommendation of mineral fertilizer was 100 kg ha-1 P205, 40 hg ha-1 K2O and 50 kg N ha-1 provided by superphosphate, potassium chloride and ammonium sulfate, respectively; the subplots for five harvest times (60, 88, 116, 144 and 172 days after transplant). The extraction of essential oil of citronella grass was made by hydrodistillation and the identification of compounds of the essential oil by GC/MS. The mineral fertilizer of 150% of the recommended dose propitiated the biggest taxes of growth in all the analyzed variable. The biggest essential oil content was obtained in the doses of 100% (1.59%) and 150% of NPK (1.67%). Ten chemical compounds were identified in essential oil of citronella grass, between monoterpenes and sesquiterpenes. The majority compounds of the essential oil were the citronellal, geraniol and elemol. The content and the composition of the essential oil of citronella grass varied depending on the dose of mineral fertilizer used.

Crescimento micelial e produção de conídios de Ascochyta cucumis em diferentes meios de cultura e regimes de luz / Mycelial growth and conidial production of Ascochyta cucumis in different culture media and light regimen

A planta da melancia pode ser infectada por diversos patógenos que podem provocar perdas na produtividade e qualidade dos frutos. Entre estes, o fungo Ascochyta cucumis, que é o agente causal do crestamento gomoso do caule em plantas de melancia pode ser considerado um grande problema. Para estudos de laboratório e de campo é importante ter um crescimento e esporulação abundante do patógeno em estudo. No entanto, estudos sobre a esporulacao de A. cucumis em diferentes meios de cultura são escassos na literatura nacional e internacional. O objetivo deste trabalho foi estudar a influência de diferentes meios de cultura e do regime de luz no crescimento micelial e produção de conídios de A. cucumis. Foi utilizado o delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 7 x 3, com cinco repetições. Os meios testados foram: BDA; BDA modificado; V8 modificado; aveia; cenoura; folha de melancia e folha de melancia+CaCO3. Todos os meios foram submetidos à luz contínua, fotoperíodo 12 hr e escuro contínuo. Os meios que mais favoreceram o crescimento micelial foram folha de melancia + CaCO3, folha de melancia e BDA modificado, respectivamente, sob regime de luz contínua. Maior produção média de conídios foi obtida nos meios folha de melancia e folha de melancia+CaCO3. O meio folha de melancia+CaCO3 foi o que mais favoreceu a produção de conídios mesmo em diferentes regimes de luz.

Watermelon plants can be infected by different pathogens that can cause losses in yield and fruit quality. Among these, the fungus Ascochyta cucumis, which is the causal agent of gummy stem blight in watermelon plants can be considered the major problem. To laboratory and field studies it is important to have an abundant growth and sporulation of the studied pathogen. However, studies on the sporulation of A. cucumis at different culture media are scarce in the national and international literature. Thus, the objective of this work was to study the effect of different culture media and the light regimens on the mycelial growth and conidial production of A. cucumis. The experiments were performed in a completely randomized design in a factorial 3 x 7, with five replicates. The media tested were the following: BDA, modified BDA, modified V8, oatmeal, carrot, watermelon leaf and watermelon leaf + CaCO3. All media were submitted to continuous light, 12 hr photoperiod and continuous darkness. The media that most favored the mycelial growth were the watermelon leaf + CaCO3, watermelon leaf and modified BDA under continuous light regimen. Increased average production of conidia was afforded by watermelon leaf media and watermelon leaf + CaCO3 media. The watermelon leaf + CaCO3 media was the one that most favored the production of conidia, even at different levels of light regimens.

Rhizobia amylase production using various starchy substances as carbon substrates

Six isolates of indigenous rhizobia of Central Amazonia were screened for the production of amylases in liquid media using various starchy substances as carbon sources. All rhizobia strains could produce more extracellular protein, biomass and amylases with the different kinds of carbon substrates. Among the carbon sources tested maltose was the best substrate for protein and amylase production. In general, peach palm flour and corn starch (maizena®) were also considered to be good carbon sources for rhizobia amylases. On the other hand, the biomass production by the rhizobia isolates was higher in the presence of oat flour. INPA strain R-926 was a good amylase producer in maltose (1.94 U) and corn starch (0.53 U) media. INPA strain R-991 was also a good amylase producer in maltose (1.66 U) and corn starch (1.59 U) yielding significant extracellular amylase. Correlation analysis showed significant and positive relationships between rhizobia amylases and final pH (r = 0.49, P < 0.05), extracellular protein (r = 0.47, P < 0.47) and biomass production (r = 0.69, P < 0.01) in the maltose medium. The results obtained in this study revealed several Central Amazonian rhizobia strains as promising sources of amylase for biotechnological applications, especially in starch industry.

Seis isolados de rizobia nativos da Amazonia Central foram selecionados para a produção de amilases em meio de cultura líquido, usando várias substâncias amiláceas como fontes de carbono. Os resultados mostraram que todos os isolados de rizobia podem produzir quantidades diferenciadas de proteína extracelular, biomassa e amilases com diferentes tipos de fontes de carbono. Entre as fontes testadas, maltose foi a melhor para as produções de proteína e amilase. Por outro lado, a produção de biomassa pelos isolados de rizobia foi maior na presença de farinha de aveia. O isolado INPA R-926 mostrou-se um bom produtor de amilase nos meios com maltose (1,94 U) e amido de milho (0,53 U). O isolado INPA R-991 também foi um bom produtor de amilase com rendimentos significativos na presença de maltose (1,66 U) e amido de milho (1,59 U). As análises de correlação revelaram relações positivas e significativas entre as atividades de amilase e pH final (r = 0,49, P < 0,05), proteína extracelular (r = 0,47, P < 0,47) e a produção de biomassa (r = 0,69, P < 0,01) no meio com maltose. Os resultados obtidos nesse estudo revelaram alguns isolados de rizóbio da Amazônia Central como fontes promissoras de amilases para aplicações biotecnológicas, especialmente na indústria do amido.